蛋白磷酸化是重要的共价翻译后修饰，可以改变蛋白质的结构构象，并调控靶蛋白的功能， 位置和特异性结合。许多细

胞过程受蛋白质的可逆磷酸化调控，30%的蛋白质可能在其存在过程中被磷酸化。

由于内源性蛋白的产生和降解处于平衡状态，因此在稳定的环境条件下其细胞水平是稳定的。细胞粗提取物含有许多内源

性酶，例如磷酸酶和蛋白酶，其能够降解和改变提取物中的蛋白。提高完整蛋白产量的最佳方法是加入这些酶的抑制剂。更

多的抑制剂意味着更好的磷酸化保护。我们提供两管具有不同溶液形式的抑制剂，帮助您更好地抑制磷酸酶。管A 含有 Cantharidin、Bromotetramisole 和 Microcystin LR，以 DMSO 的即用溶液提供。管 B 含有 Sodium orthovanadate、Sodium

molybdate、Sodium tartrate、Imidazole 和 Sodium Fluoride， 以 ddH2O 的即用溶液提供。

试验操作  

在室温下解冻，然后在实验前以 1:100（v / v）稀释至溶液样品（如细胞裂解物或组织提取物），依次加入 A 管和 B 管：加

A 管，混匀；再加 B 管，混匀（不可将 A 管和 B 管混合后再一起加入）。

Phosphatase Inhibitor Cocktail (2 Tubes, 100X) 可 用 于 Western Blot, Co-IP, pull-down, IF, IHC, kinase assay 等实验

注意事项

1.本产品不含EDTA, 为100×H2O 和100×DMSO 储存液形式。使用时应调整浓度为1×。

2.本产品置于-20℃保存时，DMSO 呈现冰晶状态，此属于正常现象，非产品质量问题。若B 管融化时间较长，可在25℃水浴

中融化。

3.A.B 两管不可以同时加入，以防止沉淀形成。必须先加A 管，再加B 管。

4. 本产品仅供科研使用。

问题解答

-Q：可否将A、B两管产品混合后再加入裂解液中？

A：将A管和B管预先混合会形成浅绿色的沉淀，该沉淀主要是析出的盐类，沉淀会同时影响A管的盐类和B管的天然化合物。

这些沉淀无法完全重新溶解。因此需要避免这种混合方式，而是按照说明书分别加入两管产品。

-Q：Western Blot实验时磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白的条带都非常弱应该怎么解决？

-A：首先保证蛋白上样量足够；其次，需要同时加入蛋白酶抑制剂Cocktail（和磷酸酶抑制剂Cocktail来保护蛋白不被降解。

-Q：为什么A管的融化时间比B管的长？

-A：因为A管的溶剂是DMSO，B管的溶剂是ddH2O，相比之下DMSO融化的速度更慢，特别是在低温条件下。

可采用在25°C 水浴中融化，亦可将A管分装成多个小管。